正文
增強子的序列是含兩組72bp串聯(lián)(順向)重復序列,核心部分為T(mén)GTGGAATTAG。
簡(jiǎn)介
增強子是指能使和它連鎖的基因轉錄頻率明顯增加的DNA序列。作為基因表達的重要調節元件,增強子序列大多為重復序列,一般長(cháng)約50bp,適合與某些蛋白因子結合。其內部常含有一個(gè)核心序列:(G)TGGA/TA/TA/T(G),是產(chǎn)生增強效應時(shí)所必需的。
1981年Benerji在SV40DNA中發(fā)現一個(gè)140bp的序列,它能大大提高SV40DNA/兔β—血紅蛋白融合基因的表達水平,這是發(fā)現的第一個(gè)增強子。它位于SV40早期基因的上游,由兩個(gè)正向重復序列組成,每個(gè)長(cháng)72 bp。目前發(fā)現的增強子多半是重復序列,一般長(cháng)50bp,通常有一個(gè)8—12bp組成的“核心”序列,如SV40增強子的核心序列是5’—GGTGTGGAAAG—3’。
相關(guān)研究
觀(guān)測位于HPV16 LCR序列YY1結合位點(diǎn)上游的組織特異性增強子序列對YY1蛋白的啟動(dòng)子P97抑制作用的影響。方法 構建帶有不同長(cháng)度的HPV16野生株、啟動(dòng)子遠端YY1位點(diǎn)突變株、啟動(dòng)子近端YY1位點(diǎn)突變株的5′端LCR缺損序列的熒光素酶報導質(zhì)粒,以及不同長(cháng)度的近端YY1/SP1重疊結合位點(diǎn)基因工程突變LCR的熒光素酶報導質(zhì)粒;將各種質(zhì)粒轉染到人類(lèi)子宮頸癌細胞系C33A中,檢測在不同LCR序列的控制下對病毒啟動(dòng)子P97的活性的影響。結果 去除上游增強子序列后,遠端YY1位點(diǎn)突變的P97激活作用完全消失,近端YY1位點(diǎn)突變的P97激活作用部分喪失。不同長(cháng)度的近端YY1/SP1重疊位點(diǎn)基因工程突變LCR對P97活性的影響不受上游啟動(dòng)子序列的控制。結論 YY1蛋白對啟動(dòng)子P97的抑制效應受位于其上游序列的增強子的控制。
人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型的長(cháng)控制區(long control region,LCR)為病毒基因轉錄的重要調節區域。在LCR中部有一組織特異性增強子區域,可在上皮細胞內增強病毒早期啟動(dòng)子P97的活性。增強子是由許多轉錄激活因子的特異性結合位點(diǎn)組成,其中包括有AP1、NF1、Oct1、TEFⅠ等〔1〕。細胞轉錄調節蛋白YY1廣泛存在于上皮細胞胞核內〔2〕,對P97的活性起負性調節作用〔3-5〕。YY1蛋白可通過(guò)多種方式對不同的啟動(dòng)子活性進(jìn)行正相或負相調節,其機理包括與其它活性蛋白發(fā)生蛋白-蛋白間相互作用〔6〕,與其它活性蛋白競爭性結合相應的結合位點(diǎn)〔7〕,通過(guò)蛋白與DNA結合引起DNA空間結構的改變〔8〕以及與其它非DNA結合活性蛋白作用后使后者作用于轉錄起始部位〔9〕。
在HPV16 LCR序列上存在有多個(gè)YY1特異性結合位點(diǎn),分布于增強子和啟動(dòng)子P97之間。由于增強子是由多個(gè)轉錄激活因子結合位點(diǎn)構成,因而有可能會(huì )參與YY1蛋白對P97的活性抑制作用。我們構建了不同的HPV16標準序列、啟動(dòng)子遠端YY1位點(diǎn)和近端位點(diǎn)突變的5′端缺損LCR熒光素酶報道質(zhì)粒,經(jīng)轉染細胞檢測發(fā)現,在除去增強子后YY1結合位點(diǎn)突變引起的啟動(dòng)子活性增強效應明顯減弱或消失。這表明YY1蛋白對P97的調節作用有賴(lài)于上游的增強子序列。
相關(guān)詞條